中文名稱：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
中文別名：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
中文別名：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
產(chǎn)品類別：造血干細(xì)胞的分離
產(chǎn)品編號(hào)：LGS1068CB05
產(chǎn)品名稱：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT
產(chǎn)品價(jià)格：￥1800.00元
人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT說明書
【產(chǎn)品簡介】
臍帶血收集采用自然放血且從產(chǎn)房采集到細(xì)胞分離時(shí)長一般大于 2 小時(shí)，與外周血靜脈采血且及時(shí)分離相比會(huì)影響分離效果，為此，灝洋優(yōu)化配方以提高臍帶血干細(xì)胞分離得率，請(qǐng)廣大醫(yī)療及科研用戶使用并提出寶貴意見。
【包裝規(guī)格】
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
適用儀器：最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
方法一：
方法二：
【注意事項(xiàng)】
1. 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，
最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過 6h后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實(shí)驗(yàn)干細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
D.PCR 技術(shù)
【可能存在的問題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到最佳分離效果，離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。
產(chǎn)品編號(hào)：LGS1068CB05
產(chǎn)品名稱：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT
產(chǎn)品價(jià)格：￥1800.00元
人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT說明書
【產(chǎn)品簡介】
臍帶血收集采用自然放血且從產(chǎn)房采集到細(xì)胞分離時(shí)長一般大于 2 小時(shí)，與外周血靜脈采血且及時(shí)分離相比會(huì)影響分離效果，為此，灝洋優(yōu)化配方以提高臍帶血干細(xì)胞分離得率，請(qǐng)廣大醫(yī)療及科研用戶使用并提出寶貴意見。
【包裝規(guī)格】
| 名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | |
| A | 人臍帶血干細(xì)胞分離液 | LGS1068CB-200 | 200ml |
| B | 紅細(xì)胞沉降液（贈(zèng)品） | HES-TBD550 | 200ml |
| C | 清洗液（贈(zèng)品） | 2010X1118-100 | 200ml |
| D | 說明書 | 1 份 | |
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
適用儀器：最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
方法一：
- 新鮮抗凝臍血與生理鹽水及紅細(xì)胞沉降液（6%羥乙基淀粉）按 1：1：1 的比例混合，自然沉降 30min（具體沉降時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同樣本對(duì)應(yīng)調(diào)整以保證沉降效果）。
- 沉降后取上層液體，300g 離心 15min，棄去 50%上清，以剩余 50%上清重懸沉淀，制成細(xì)胞懸液。
- 取 50mLPBMC 高效離心管，加入 15ml 分離液，200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下，傾去隔片上殘留的分離液。
- 將細(xì)胞懸液加至隔片上，400-500g，離心 20-30min。
- 離心后取白色環(huán)狀目的細(xì)胞層，清洗后重懸備用。
方法二：
- 新鮮抗凝臍血與紅細(xì)胞沉降液（6%羥乙基淀粉）按 1：1 的比例混合。
- 取 50mLPBMC 高效離心管，加入 15ml 分離液，200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下，傾去隔片上殘留的分離液。
- 將與沉降液混勻的樣本加至隔片上，400-500g，離心 25min。
- 離心后取白色環(huán)狀目的細(xì)胞層，清洗后重懸備用。
【注意事項(xiàng)】
1. 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，
最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過 6h后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
- 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面，影響細(xì)胞分離效果。
- 如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實(shí)驗(yàn)干細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
| 紅細(xì)胞 | 白細(xì)胞 | 血小板 | |||
| （4.0-10.0）×109 | |||||
| （4.0-5.5）×1012 | （1.0-3.0）×1011 | ||||
| 含量（個(gè)/L） | 中性粒細(xì)胞 | 淋巴細(xì)胞 | 單核細(xì)胞 | ||
| 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |||
| 【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】 | |||||
- 所獲得干細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
- 所獲得干細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
- 所獲得干細(xì)胞的鑒定方法A.流式細(xì)胞技術(shù)B.免疫組化技術(shù)C.原位雜交技術(shù)
D.PCR 技術(shù)
【可能存在的問題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
| 出現(xiàn)情況 | 出現(xiàn)原因 | 建議解決方案 | |
| 離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 | 轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短 | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 | |
| 離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 | 轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長 | ||
| 離心后白環(huán)層彌散 | 細(xì)胞密度過大 | 調(diào)整細(xì)胞密度 | |
| 離心后白環(huán)層太淺或看不見 | 細(xì)胞密度過小 | ||
- 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，恒定離心時(shí)間，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
- 本分離液依照國際標(biāo)準(zhǔn)，全部使用藥用級(jí)原料，性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到最佳分離效果，離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。
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